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利用酪酷胺信號放大(Tyramide signal amplification)技術使目標蛋白標記上熒光。一抗洗脫后，進行下一個目標蛋白的熒光染色，再洗脫，再下一個目標蛋白的熒光染色...循環反復可實現同一張樣本多個蛋白的不同熒光標記。